高效液相色谱-串联质谱法检测干血点样品中25-羟基维生素D2和25-羟基维生素D3的方法
作者： 高洁
单位： 陕西博荟精准医疗科技有限责任公司,西安710000
摘要： 目的:建立一种利用高效液相-串联质谱法检测干血点(DBS)标本中25-羟基维生素D2[25(O H)D2]和25-羟基维生素D3[25(OH)D3]的可行方法.方法:以DBS为样本,以4-苯基-1,2,4-三唑啉-3,5-二酮(PTAD)为试剂进行分析物衍生化.使用0.3％ 甲酸甲醇直接超声提取分析物,避开了通常情况下DBS样本前处理中的全血复溶和蛋白质沉淀等繁琐步骤;通过高效液相-串联质谱以25(O H)D2-D6和25(O H)D3-D3为同位素内标,消除基质效应的影响.前处理后的样本进行LC-M S/M S分析,使用C18柱进行分离,流动相为甲醇(含0.1％ 甲酸)-水(0.1％ 甲酸、2mM甲酸铵,80:20,V/V),洗脱时间为7min,使用电喷雾正离子源(ESI+)模式和多反应监测模式(MRM)定量,同位素内标法定量.结果:得到25(OH)D2和25(OH)D3分别在全血浓度的0～100ng/mL的范围内线性良好,相关系数r>0.999.结论:该方法使用血量少、易贮存和转运,能准确的定量人群中维生素D的含量.
关键词：
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所属期刊栏目：
仪器应用
分类号：
页码：
51-55
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